C-reactive protein for the diagnosis and prognosis of visceral leishmaniasis caused by Leishmania infantum

Acute-phase reaction (APR) and its marker C-reactive protein (CRP) are heightened in some infectious diseases. APR may contribute to clinical manifestations of systemic inflammation such as hemorrhages, anemia and edema. These symptoms are shared by visceral leishmaniasis (VL), a disease caused by the protozoa Leishmania infantum and L. donovani. The former is zoonotic, hitting mostly children and the immunosuppressed, with higher mortality. As APR and CRP have not been studied in VL caused by L. infantum, we decided to investigate their role as diagnostic and prognostic tools in Brazil. We measured CRP in 136 patients before the treatment of VL and 128 who survived and returned 30 days later and compared it to the clinical presentation, HIV status, and disease severity. Sensitivity for the disease was 97.8% (95%CI: 93.7 - 99.5) and specificity was 85.9% (95%CI: 78.7 - 91.0) with the cut-off of 10mg/L. There was no association of CRP concentration with demographic, clinical and laboratory data. The correlation between pre-and post-treatment levels existed but was poor. Marginal association with the presence of parasites in the bone marrow and death was noticed. The role of APR in the pathogenesis of VL and disease severity remains to be explored. However, the study reveals the significant role of CRP for VL caused by L. infantum and should be routinely required for the diagnosis and follow-up.

Fatores ambientais associados à ocorrência de leishmaniose visceral canina em uma área de recente introdução da doença no Estado do Rio de Janeiro, Brasil / Factores ambientales asociados a la ocurrencia de leishmaniosis visceral canina en un área de reciente introducción de la enfermedad en el estado de Río de Janeiro, Brasil / Environmental factors associated with canine visceral leishmaniasis in an area with recent introduction of the disease in the State of Rio de Janeiro, Brazil

Resumo: Foi avaliada a associação entre características ambientais obtidas por sensoriamento remoto e a prevalência da leishmaniose visceral canina (LVC) no bairro do Jacaré, área de recente introdução da doença, no Município de Niterói, Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Trata-se de um estudo seccional para avaliação da prevalência de LVC, definida por meio da positividade no teste imunocromatográfico rápido em dupla plataforma (dual path platform - DPP), confirmada com o ensaio imunoenzimático (EIE). Foram incluídos 97 cães com prevalência de LVC de 21,6%. Houve maior frequência de LVC em cães com a convivência com outro cão, gambá, mico e ouriço-terrestre, assim como com a história de remoção de outros cães com LVC do domicílio. Na análise multivariada, ajustada por sexo e idade do cão, cães residentes em áreas com maior cobertura de vegetação esparsa apresentaram prevalência da infecção por Leishmania infantum cinco vezes maior do que aqueles que residiam em áreas menos vegetadas (OR = 5,72; IC95%: 1,47-22,20). Por outro lado, áreas mais urbanizadas caracterizadas como comerciais ou residenciais carentes, identificadas pelo sensoriamento remoto como aquelas com alta densidade de estruturas cinza, estiveram associadas à menor ocorrência da LVC (OR = 0,09; IC95%: 0,01-0,92). A maior prevalência de infecção em cães convivendo com outros animais silvestres e em áreas com maior cobertura vegetal, associada com menor prevalência em áreas urbanizadas, indica um padrão rural de transmissão da LVC nessa área.

Resumen: Se evaluó la asociación entre las características ambientales obtenidas por teledetección y la prevalencia de la leishmaniosis visceral canina (LVC) en el barrio de Jacaré, área de reciente introducción de la enfermedad, en el municipio de Niteroi, Estado de Río de Janeiro, Brasil. Se trata de un estudio seccional para la evaluación de la prevalencia de LVC, definida mediante la positividad en el test inmunocromatográfico rápido en una plataforma de doble vía (dual path platform - DPP), confirmada con un ensayo imunoenzimático (EIE). Se incluyeron a 97 perros con una prevalencia de LVC de un 21,6%. Hubo una mayor frecuencia de LVC en perros que conviven con otros perros, zarigüeyas, monos y erizos terrestres, así como con el historial de retirada de otros perros con LVC del domicilio. En el análisis multivariado, ajustado por sexo y edad del perro, los perros residentes en áreas con una mayor cobertura de vegetación muy dispersa presentaron una prevalencia de infección por Leishmania infantum cinco veces mayor que aquellos que residían en áreas con menos vegetación (OR = 5,72; IC95%: 1,47-22,20). Por otro lado, las áreas más urbanizadas, caracterizadas como comerciales o residenciales con pocos recursos, identificadas mediante teledetección como aquellas con una alta densidad de estructuras en gris, estuvieron asociadas a una menor ocurrencia de la LVC (OR = 0,09; IC95%: 0,01-0,92). La mayor prevalencia de infección en perros, conviviendo con otros animales silvestres y en áreas con una mayor superficie vegetal, se asocia con una menor prevalencia en áreas urbanizadas, lo que indica un padrón rural de transmisión de la LVC en ese área.

Abstract: The study assessed the association between environmental characteristics obtained by remote sensing and prevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL) in the neighborhood of Jacaré, an area with recent introduction of the disease in the municipality (county) of Niterói, Rio de Janeiro State, Brazil. This was a cross-sectional study to assess CVL prevalence, defined as a positive result in the dual path platform (DPP) rapid immunochromatographic assay, confirmed by immunoenzymatic assay (IEA). The study included 97 dogs, with 21.6% CVL prevalence. CVL prevalence was higher in dogs with contact with another dog, opossum, marmoset, or hedgehog, as well as history of culling of other dogs with CVL from the household. In the multivariate analysis, adjusted for the dog's sex and age, dogs in areas with sparse vegetation showed fivefold higher prevalence of Leishmania infantum infection compared to dogs in areas with less vegetation (OR = 5.72; 95%CI: 1.47-22.20). Meanwhile, less urbanized areas, characterized as commercial or low-income residential areas, identified by remote sensing as those with high density of gray structures, were associated with lower CVL prevalence (OR = 0.09; 95%CI: 0.01-0.92). The higher prevalence of infection in dogs living alongside wild animals and in areas with more vegetation and lower prevalence in more urbanized areas suggest a rural transmission pattern for CVL in this area.

Aspectos epidemiológicos da leishmaniose visceral canina na zona rural do semiárido paraibano e análise de técnicas de diagnóstico / Epidemiological aspects of canine visceral leishmaniasis in the semi-arid region of Paraiba and analysis of diagnostic techniques

No Brasil, a leishmaniose visceral é causada pela Leishmania infantum. É uma zoonose crônica e, frequentemente, fatal, sendo considerada um grave problema de saúde pública no mundo e reconhecida pela Organização Mundial de Saúde como uma das dezessete "Doenças Tropicais Negligenciadas". O presente estudo foi realizado em 2012, na zona rural do município de Patos, semiárido paraibano, com o objetivo de estimar a prevalência, os fatores de risco da leishmaniose visceral canina (LVC) na região e avaliar os testes de diagnóstico sorológico. Foram coletadas 362 amostras de sangue e a prevalência da infecção foi determinada através de três técnicas sorológicas (ELISA, RIFI e Teste Imunocromatográfico DPP - Dual Path Plataform), sendo consideradas positivas as amostras que apresentaram pelo menos dois testes reagentes. As amostras positivas na sorologia foram testadas na PCR e qPCR. Aplicou-se um questionário epidemiológico aos proprietários para identificação dos possíveis fatores de risco. A taxa de prevalência foi de 11,33% (41/362). Considerou-se o ELISA como padrão ouro, já que é o teste confirmatório para a LVC pelo Ministério da Saúde. O DPP (Dual Path Plataform) apresentou sensibilidade de 58% (95% CI: 0,43-0,72) e especificidade de 96% (95% CI: 0,93-0,98), com índice Kappa de 0,57. A RIFI apresentou sensibilidade de 85% (95% CI: 0,72-0,94), especificidade de 99% (95% CI: 0,98-1) e valor Kappa de 0,88. O fator de risco identificado na análise multivariada por regressão logística múltipla foi o sexo (OR=2,15 [1,09-4,21]) e os cães machos apresentaram 2,15 vezes mais chances de serem infectados, que pode ser justificado por serem mais utilizados para a caça e como cão de guarda, dois fatores que aumentam a exposição do animal ao flebótomo. Em função da taxa de prevalência encontrada, indica-se a aplicação de medidas de controle no município. Os resultados da comparação dos ensaios sorológicos demonstraram que o DPP (Dual Path Plataform) não é a melhor técnica para triagem dos animais positivos em função da baixa sensibilidade do método, sugerindo que o mesmo seja substituído pelo ELISA.(AU)

Visceral leishmaniasis is caused by Leishmania infantum in Brazil. It is a chronic disease and often a fatal zoonosis and considered as a serious worldwide public health problem and recognized by the World Health Organization as one of seventeen "Neglected Tropical Diseases". This study was conducted in 2012 in the county of Patos, in Paraíba State semiarid region. The main purposes were to estimate the prevalence and the risk factors of canine visceral leishmaniasis (CVL), and to evaluate the performance of serological tests. Serological prevalence was determined using three techniques (ELISA, IFA and DPP chromatographic immunoassay - Dual Path Platform). ELISA was the golden standard, since it is the confirmatory test for CVL as established by the Brazilian Ministry of Health. In total, 362 blood samples were collected and were considered positive if positive by two serological assays. Positive samples were tested by PCR and qPCR. An epidemiological questionnaire was applied to the dog owner to identify risk factors associated with CVL. The seroprevalence was 11.33% (41/362). Chromatographic immunoassay - DPP showed a sensitivity of 58% (95%, CI: 0.43 to 0.72) and specificity of 96% (95%, CI: 0.93-0.98) , with a Kappa index of 0.5. The IFA had a sensitivity of 85% (95%, CI: 0.72 to 0.94), specificity of 99% (95%, CI: 0.98 to 1) and Kappa value of 0.8. The risk factor identified in the multivariate analysis was gender (OR=2.15 [1.09 to 4.21]), male dogs having 2.15 times more chance of being infected. The increased likelihood can possibly be explained by the use of male dogs for hunting and as guard dogs, two factors that increase dog contact to infected sandflies. Due to the prevalence rates, it should be recommended control measures against canine visceral leishmaniasis. The results demonstrated that the Chromatographic immunoassay (DPP-Dual Path Platform) is not the best technique for screening positive animals due to its low sensitivity, suggesting its replacement by ELISA.(AU)

Diagnosis of Leishmania infantum infection by Polymerase Chain Reaction in wild mammals / Diagnóstico de infecção por Leishmania infantum pela reação em cadeia da polimerase em mamíferos silvestres

Visceral leishmaniasis is a chronic infectious disease caused by Leishmania infantum (synonym: Leishmania chagasi) and transmitted by the sandfly Lutzomyia longipalpis in Brazil. It is an endemic zoonosis in several regions of the country, including Belo Horizonte (State of Minas Gerais). In urban areas, the domestic dog is susceptible and considered the most important animal reservoir. However, L. infantum has been previously diagnosed in other species, including captive primates and canids. This study aimed to evaluate the presence of the agent DNA in captive animals as well as some free ranging animals from the Zoo-Botanical Foundation of Belo Horizonte by Polymerase Chain Reaction. Eighty one blood samples from primates, carnivores, ruminants, edentates, marsupial, and a monogastric herbivore were analyzed. Three primates Alouatta guariba (brown howler monkey), and two canids Speothos venaticus (bush dog) were positive, demonstrating the importance of leishmaniasis control in endemic areas for preservation of wildlife species in captivity.

A leishmaniose visceral é uma doença infecciosa crônica de mamíferos causada, no Brasil, pelo protozoário Leishmania infantum (sinonímia: Leishmania chagasi) e transmitida pelo flebótomo Lutzomyia longipalpis. Trata-se de uma zoonose endêmica em muitas regiões do Brasil, inclusive em Belo Horizonte, Minas Gerais. Em centros urbanos, leishmaniose visceral acomete principalmente o cão doméstico. Entretanto, L. infantum já foi diagnosticada em outras espécies, incluindo canídeos e primatas de cativeiro em zoológicos. Este estudo buscou avaliar a presença do DNA deste agente em animais de cativeiro e de vida livre da Fundação Zoobotânica de Belo Horizonte através da reação em cadeia da polimerase. Foram analisadas oitenta e uma amostras de sangue oriundas de primatas, carnívoros, ruminantes, edentatos, marsupial e herbívoro de estômago simples. Três primatas Alouatta guariba (bugio marrom) e dois canídeos Speothos venaticus (cachorro-do-mato-vinagre), foram positivos, demonstrando a importância do controle da leishmaniose em áreas endêmicas com a finalidade de conservar a fauna silvestre mantida em cativeiro.

Awareness of visceral leishmaniasis and its relationship to canine infection in riverside endemic areas in Northeastern Brazil

Introduction An awareness of visceral leishmaniasis (VL) is necessary to encourage the population to participate in prevention and control in collaboration with more efficient, centrally organized health programs. The aim of this study was to evaluate the awareness of the riverside population regarding VL and the association between awareness and the prevalence of canine visceral leishmaniasis (CVL). Methods In total, 71 people living in riverside areas in the City of Mossoró in State of Rio Grande do Norte participated of the study, and 71 dogs were tested for CVL by polymerase chain reaction (PCR). Association analysis of several variables related to knowledge of the riverside population regarding CVL positivity was performed, yielding odds ratios (OR) and 95% confidence intervals (CI), and significance was determined using chi-square (χ2) and Fisher's exact tests. Results Among individuals whose dogs tested positive for CVL, 60% did not know the cure for CVL, and these subjects were three times more likely to have a dog test positive for CVL than those who were aware the cure for CVL. Knowledge of CVL cure was the only variable that remained in the logistic model after the successive removal of variables, with an adjusted OR of 3.11 (95%CI: 1.1-8,799; p=0.032). Conclusions Insufficient awareness regarding VL in riverside areas with CVL-positive dogs was associated with increased rates of canine infection, which suggests that changes in habits and the adoption of attitudes and preventive practices may contribute to the control and prevention of this disease. This study reinforces the need to invest in better health education programs regarding VL. .

Factors associated with Leishmania chagasi infection in domestic dogs from Teresina, State of Piauí, Brazil / Fatores associados à infecção por Leishmania chagasi em cães domiciliados de Teresina, Estado do Piauí, Brasil

INTRODUCTION: Many studies have evaluated risk factors for human visceral leishmaniasis, but few have focused on the infection among dogs. The objective of this study was to assess the association between peridomestic socioeconomic and environmental factors and the presence of dogs seropositive for Leishmania chagasi in the City of Teresina, Brazil. METHODS: This case-control study was based on the results of a routine seroepidemiological survey among domestic dogs carried out in 2007. Serological tests were performed by means of indirect immunofluorescence antibody test. All dwellings in which at least one seropositive dog was detected were considered cases, and controls were a random sample of dwellings in which only seronegative dogs were identified. Associations between variables were expressed as odds ratios (OR) and their respective 95% confidence intervals (95%CI) estimated using multivariate logistic regression. RESULTS: Dwellings with a history of dogs removed by the visceral leishmaniasis control program in the last 12 months had five-fold higher odds of having at least one seropositive dog as compared with dwellings having no history of dog removal (OR = 5.19; 95%CI = 3.20-8.42). Dwellings with cats had 58% increased odds of dog infection as compared with those having no cats (OR = 1.58; 95%CI = 1.01-2.47). CONCLUSIONS: Identification of factors associated with canine visceral leishmaniasis might be used for the delimitation of areas of higher risk for human visceral leishmaniasis, since infection in dogs generally precedes the appearance of human cases.

INTRODUÇÃO: Diversos estudos avaliaram fatores de risco para leishmaniose visceral humana, mas poucos focalizaram a infecção canina. O objetivo deste estudo é avaliar a associação entre condições sócio-ambientais peridomiciliares e a presença de cães sorologicamente positivos para Leishmania chagasi em Teresina, Brasil. MÉTODOS: Estudo caso-controle baseado nos resultados de inquérito soroepidemiológico de rotina entre cães domésticos no ano de 2007. O exame sorológico foi realizado por meio de reação de imunofluorescência indireta. Foram consideradas como casos todas as residências que albergassem pelo menos um cão soropositivo, enquanto o grupo controle correspondeu a uma amostra aleatória das residências onde somente cães soronegativos foram registrados. Associações entre as variáveis foram expressas por meio da razão de chance ou odds ratio (OR) e respectivos intervalos de 95% de confiança (IC95%) estimados mediante regressão logística multivariada. RESULTADOS: Residências com história de pelo menos um cão recolhido pelo programa de controle da leishmaniose visceral nos últimos 12 meses apresentaram chance cerca de 5 vezes mais alta de terem cães infectados em comparação com residências sem história de cães removidos no período (OR = 5,19; IC95% = 3,20-8,42). Residências com presença de gatos apresentaram chance 58% mais alta de terem cães infectados em comparação com aquelas sem gatos (OR = 1,58; IC95% = 1,01-2,47). CONCLUSÕES: A identificação de fatores associados à leishmaniose visceral canina pode ser útil para a delimitação de áreas sob maior risco para leishmaniose visceral humana, na medida em que a infecção canina geralmente precede a ocorrência de casos humanos.

Prevalência de infecção por Leishmania chagasi utilizando os métodos de ELISA ( rK39 e CRUDE ) e intradermorreação de Montenegro em área endêmica do Maranhão, Brasil / Prevalence of infection by Leishmania chagasi using ELISA ( rK39 and CRUDE ) and the Montenegro skin test in an endemic leishmaniasis area of Maranhão, Brazil

Realizou-se estudo prospectivo com 1.520 indivíduos menores de 15 anos no Município de São José de Ribamar, Maranhão, Brasil, de junho de 1994 a janeiro de 1995, com o objetivo de avaliar a prevalência e as características (fatores sócio-econômicos, ambientais e hábitos de vida) associadas à infecção por Leishmania chagasi. Realizou-se Intradermorreação de Montenegro (IDRM) e sorologia por Enzyme Linked Immunosorbant Assay (ELISA-rK39 e CRUDE). Na análise estatística foi utilizado o teste chi2 com correção de Yates, sendo considerado significante um valor de p < 0,05. A prevalência de infecção foi de 61,7 por cento pela IDRM, 19,4 por cento pelo ELISA-rK39 e 19,7 por cento pelo ELISA-CRUDE. Foi observada associação entre leishmaniose na família (p = 0,001), tipo de abastecimento de água (p = 0,000) e aplicação de inseticida (p = 0,000) com a infecção por L. chagasi pela IDRM. Nenhuma associação com infecção por L. chagasi foi observada utilizando-se a sorologia ELISA-rK39 ou CRUDE. Medidas de controle mais efetivas são necessárias para reduzir a prevalência da doença e detectar casos assintomáticos dentre o elevado porcentual de infectados nessa localidade.

Infecçäo por Leishmania (Leishmania) chagasi em crianças de uma área endêmica de leishmaniose visceral americana na Ilha de Säo Luís-MA, Brasil / Leishmania (Leishmania) chagasi infection on childhood from endemic area of visceral leishmaniasis in the Säo Luis-MA, island

Realizou-se estudo prospectivo com 648 crianças de zero a cinco anos no município da Raposa-MA, de julho/97 a junho/98, com o objetivo de avaliar as características da infecção por L.(L.)chagasi e verificar se existe associação entre desnutrição e infecção assintomática. Utilizou-se questionário com dados socioeconômicos, ambientais e hábitos de vida; realizou-se Intradermorreação de Montenegro(IDRM) com antígeno de L. amazonensis e Enzyme Linked Immunosorbant Assay(ELISA) para detectar infecção, e exame antropométrico. A prevalência inicial, final e incidência da infecção foram 18,6 por cento, 20,6 por cento e 10,8 por cento pelo IDRM, e 13,5 por cento, 34,4 por cento e 28 por cento pelo ELISA, respectivamente. A prevalência da desnutrição crônica (altura/idade) foi 26 por cento. Não houve associação estatisticamente significante entre desnutrição e infecção assintomática por L. (L.) chagasi. A forma assintomática da doença está presente nas áreas estudadas, necessitando de medidas de controle mais efetivas